为提高SARS-CoV-2检测阳性率需注意以下几点:
(1)防止标本中病毒RNA降解。标本采集过程中应避免触碰到除患者扁桃体及咽喉壁以外的其他部位,采集后应于2~4h内尽快将标本送至实验室;2°C~8°C保存条件下转运的标本运送时间不得超过72h,若转运超过72h的标本则应低于-70°C保存。
(2)多部位同时采样。本研究中部分患者多次鼻拭子、咽拭子检测均阴性,痰检阳性。病毒核酸检测阳性率最高的标本为肺泡灌洗液,其次依序为诱导深部咳痰标本、鼻咽拭子、咽拭子,然而对于无气管插管患者不主张进行肺泡灌洗。根据《新型冠状病毒肺炎病毒核酸检测专家共识》标本采集优选顺序为鼻咽拭子、咽拭子、痰,可同时采集多部位标本以提高阳性率。感染患者粪便标本中也可检测出病毒,已有学者提出粪便取样方便、标本量大,呼吁重视粪便检测SARS-CoV-2的临床价值。
(3)多部门同时检测。多个实验室同时检测也是降低核酸检测假阴性的方法之一。不同实验室RT-PCR检测SARS-CoV-2的引物、探针设计可能不同,针对的靶标(ORF1ab、N或E结构蛋白)组合也不尽相同,多个实验室同时检测能有效防止因检测试剂及操作人员等因素造成的假阴性结果。此外,已有报道证实,该病毒存在变异,不同检测方法,尤其是进行核酸测序,是降低核酸检测假阴性的可靠手段。本研究中部分病例标本在本院检验科实验室进行检测的同时也将标本送至其他实验室行RT-PCR甚至核酸测序检测。
(4)检测血清新型冠状病毒抗体。研究报道,对一组入院治疗的患者连续10d监测其体内病毒抗体免疫球蛋白M(im-munoglobulinM,IgM)和免疫球蛋白G(immuno-globulinG,IgG)的滴度,发现在入院当天患者的IgM和IgG抗体滴度表达均处于低水平甚至检测不到,而入院后第5天几乎所有患者都出现了以上两种抗体表达的增高,IgM阳性率从50%(8/16)增至81%(13/16),而IgG从81%(13/16)增至100%(16/16)。目前,国内虽尚未普及针对SARS-CoV-2抗体的检测,但随着检测技术的进步,血清学检测同样也将成为确诊病毒感染的重要方法。